How to cite:

Fatan, F, A., Qothrunnada, G, R., Elsiana, I., Ulum, K., Kurnia, K, A., Widyatamaka, S, O., Paujiah,

S., (2022) Metode Validasi Analisis Senyawa Kimia Obat dalam Sampel Biologis (Plasma Darah).

Jurnal Health Sains 3(5). https://doi.org/ 10.46799/jhs.v3i5.489

E-ISSN:

2723-6927

Published by:

Ridwan Institute

Jurnal Health Sains: p–ISSN: 2723-4339 e-ISSN: 2548-1398

Vol. 3, No.5, Mei 2022

METODE VALIDASI ANALISIS SENYAWA KIMIA OBAT DALAM SAMPEL

BIOLOGIS (PLASMA DARAH)

Fira Aulia Fatan, Gisel Rizuna Qothrunnada, Issabella Elsiana, Kholifatul Ulum, Klaritya

Anisya Kurnia, Shafa Qotrunnada Widyatamaka, Shipa Paujiah

Universitas Singaperbangsa Karawang, Karawang, Indonesia

Email: [email protected], giselr[email protected]om, bellaelsia[email protected],

kholifa[email protected], [email protected]om,

[email protected], shipaujiah@gmail.com

ARTIKEL INFO

ABSTRAK

Diterima:

10 Mei 2022

Direvisi:

11 Mei 2022

Dipublish:

23 Mei 2022

Plasma darah digunakan sebagai sampel biologis dalam menentukan

kadar senyawa obat dikarenakan konsentrasi dari obat akan berikatan

dengan reseptornya dan menentukan besar kecilnya efek farmakologi

yang diberikan dari suatu obat. Tujuan penelitian ini adalah untuk

mengetahui keakuratan plasma darah manusia sebagai sampel pada

beberapa metode validasi dengan berbagai analit yang berbeda.

Metode penelitian yang dilakukan adalah dengan melakukan studi

literatur pada beberapa jurnal yang kredibel dengan kriteria jurnal 10

tahun terakhir mengenai penentuan kadar senyawa obat dalam darah

manusia. Hasil yang didapatkan dari lima analit yang berbeda yaitu

glibenklamid kombinasi dengan metformin, formalin, vankomisin,

lisinopril dan a-mangostin yang telah dilakukan uji validasi dengan

berbagai metode validasi yaitu SPE-MIP dilanjut KCKT,

spektorofotometer UV-VIS, KCKT-UV, UPLC dan KLT densitometri

dengan menggunakan sampel plasma darah manusia, semuanya

memenuhi persyaratan validasi. Sehingga dapat disimpulkan bahwa,

plasma darah manusia yang dijadikan sebagai sampel dalam uji

validasi dengan berbagai metode dan analit yang berbeda yang telah

dilakukan seluruhnya akurat karena seluruh metode uji validasi

memenuhi persyaratan.

ABSTRACT

Blood plasma is used as a biological sample in determining the levels

of drug compounds because the concentration of the drug will bind to

its receptors and determine the size of the pharmacological effect of a

drug. The purpose of this study was to determine the accuracy of

human blood plasma as a sample in several validation methods with

different analytes. The research method used is by conducting a

literature study in several credible journals with the criteria of the

journals of the last 10 years regarding the determination of levels of

drug compounds in human blood. The results obtained from five

different analytes, namely glibenclamide combination with metformin,

formalin, vancomycin, lisinopril and a-mangostin which have been

validated using various validation methods, namely SPE-MIP followed

by HPLC, UV-VIS spectrophotometer, HPLC-UV, UPLC and TLC

densitometry using human blood plasma samples, all meet the

validation requirements. So it can be concluded that, human blood

Kata Kunci:

metode validasi

analisis senyawa

kimia; plasma

darah, sampel

biologis; validasi

senyawa kimia

Keywords:

methods for

validation of

chemical compound

analysis; blood

plasma; biological

samples; validation

of chemical

compounds

Metode Validasi Analisis Senyawa Kimia Obat dalam Sampel Biologis (Plasma Darah)

Jurnal Health Sains, Vol. 3, No.5, Mei 2022 681

plasma used as a sample in the validation test with various different

methods and analytes that have been carried out is entirely accurate

because all validation test methods meet the requirements.

Pendahuluan

Sampel biologis merupakan sampel

yang diambil dari bagian tubuh untuk tujuan

analisis. Sampel biologis yang umumnya

digunakan untuk menentukan kadar senyawa

obat dalam tubuh adalah plasma darah.

Plasma darah digunakan sebagai sampel

biologis dalam menentukan kadar senyawa

obat dikarenakan konsentrasi dari obat akan

berikatan dengan reseptornya dan

menentukan besar kecilnya efek farmakologi

yang diberikan dari suatu obat, dimana

reseptor ini sebagian besar terdapat dalam sel-

sel jaringan maka pemeriksaan kadar obat

dalam darah merupakan suatu metode yang

palinG akurat untuk pemantauan

pengobatan/farmakokinetika klinik (Rizalina

et al., 2018).

Sebelum uji praklinik dan uji

farmakologi klinik dilakukan, maka suatu

metode analisis harus divalidasi terlebih

dahulu. Validasi metode analisis adalah suatu

proses untuk membuktikan bahwa kinerja

metode analisis telah memenuhi persyaratan

yang telah ditetapkan sesuai dengan

penggunaan yang dikehendaki.

Validasi metode menurut United States

Pharmacopeia (USP) dilakukan untuk

menjamin bahwa metode analisis akurat,

spesifik, reprodusibel, dan tahan pada kisaran

analit yang akan dianalisis yang berasal

dalam matriks biologis, seperti darah, plasma,

serum, atau urin, dapat dipercaya dan dapat

dilakukan ulang untuk penggunaan yang

diinginkan (Fauziah et al., 2017).

Terdapat beberapa validasi metode

yang umumnya digunakan dalam menentukan

kadar senyawa obat dalam plasma darah yaitu

metode KLT-densitometri, Komatografi Cair

Kinerja Tinggi (KCKT) dengan detektor UV,

SPE-MIP, Ultra Performance Liquid

Chromatography (UPLC) dan

Spektrofotometer UV-VIS. Tujuan dari

penelitian ini adalah untuk mengetahui

keakuratan plasma darah manusia sebagai

sampel dalam berbagai metode validasi

dengan analit yang berbeda.

Metode Penelitian

Metode yang digunakan pada

penelitian ini merupakan literature review

dengan bahan acuan 5 jurnal mengenai

penentuan kadar senyawa obat dalam plasma

darah manusia. Literature review merupakan

metode yang mengkaji suatu topik yang sama

dari berbagai jurnal untuk menghasilkan suatu

tulisan mengenai topik tersebut. Dalam artikel

beberapa metode penentuan yang digunakan

yakni SPE-MIP, KCKT, Spektorofotometer

UV-VIS dan UPLC.

Fira Aulia Fatan, Gisel Rizuna Qothrunnada, Issabella Elsiana, Kholifatul Ulum, Klaritya

Anisya Kurnia, Shafa Qotrunnada Widyatamaka, Shipa Paujiah

682 Jurnal Health Sains, Vol. 3, No.5, Mei 2022

Hasil dan Pembahasan Tabel Hasil

Analit

Matriks

Sistem

• LLOQ

(µg/mL)

Pustaka

Glibenklamid

Kombinasi

Metformin

Plasma

darah

manusia

SPE-MIP dilanjut

KCKT

- Fase gerak =

asetonitril:dapar

fosfat dengan

perbandingan

20:80; 30:70;

40:60; 50:50;

55:45 v/v,

asetonitril:TFA

0,1% 55:45 v/v.

- Kolom = SPE

C18

- Elusi = gradient

- Laju air = 1

mL/menit

Detector = UV (227

nm)

Tidak disebutkan

Formalin

Plasma

darah

manusia

Spektorofotometer

UV-VIS

- Perbandingan

sampel:reagen=

standar formalin

(0,2

ppm):pararosanil

line HCl (25

ppm) dengan

perbandingan

1:0,5, 1:1, 1:2.

- Nilai presisi =

1,047%

- Detector = UV-

Vis double

beam(539 nm)

Tidak disebutkan

Vankomisin

Plasma

darah

manusia

KCKT-UV

- Fase gerak = 5

mM dapar fosfat

pH 3 dan

metanol (80:20

v/v) pada suhu

kamar.

- Kolom = C18

- Elusi = isokratik

- Laju air = 1

mL/menit

Detector = UV (213

nm)

• 3,0

Pengaruh Motivasi Kerja, Lingkungan Kerja Fisik, Employee Engagement terhadap Kinerja

Perawat di Rumah Sakit Taman Harapan Baru

Jurnal Health Sains, Vol. 3, No.5, Mei 2022 683

Analit

Matriks

Sistem

• LLOQ

(µg/mL)

Pustaka

Lisinopril

Plasma

darah

manusia

UPLC

- Fase gerak =

dapar asetat 0,01

M:ACN:MeOH

perbandingan

70:20:10,

70:15:15 dan

70:10:20 (v/v/v).

- Kolom =

Acquity BEH

C18

- Elusi = isokratik

- Laju air = 0,3

mL/menit

- Detector = UV

(296 nm)

Tidak disebutkan

A-Mangostin

Plasma

darah

manusia

KLT-densitometri

- Fase gerak =

kloroform : etil

asetat (9:1).

- Elusi = isokratik

- Detector = UV

(254 nm) dan

TLC Scanner 4

(317 nm)

Tidak disebutkan

Berdasarkan hasil data yang di peroleh

metode yang digunakan untuk validasi dalam

sample plasma darah manusia dapat

dilakukan dengan berbagai metode seperti

KCKT, UPLC, spektrofotometer UV-VIS, dll

namun dengan adanya perbedaan tersebut

tetap menghasilkan suatu metode yang valid

untuk menganalisis suatu analit dalam plasma

darah manusia. Glibenklamid adalah suatu

obat yang sukar larut air dan merupakan obat

golongan sulfonylurea (Susanto, 2019).

Dalam validasi metode ini dilakukan

menggunakan metode analisis KCKT dengan

modifikasi pada pretreatment ekstraksi fase

padat molecularly imprinted polymer (SPE-

MIP). Modifikasi ini dilakukan dengan tujuan

dapat memperbaiki kekurangan yang terjadi

pada SPE yaitu keselektifan SPE bergantung

pada penjerap yang digunakan untuk

berikatan dengan analitnya jika lebih kuat

maka analit dapat terperangkap dalam

penjerap, oleh karena itu MIP bertujuan untuk

memiliki selektifitas yang tinggi terhadap

molekul targetnya.

Prosedur pertama yang dilakukan

adalah penyiapan alat dan bahan. Seperti

dilakukan pembuatan fase gerak yaitu TFA

0,1%, larutan baku sampel yaitu

glibenklamid, metformin HCL, dan glikazid

sebagai baku internal. Selanjutnya optimasi

kondisi system KCKT, system SPE-MIP, dan

validasi metode (Rohayati et al., 2015).

Prosedur pengerjaan yang pertama

adalah dilakukan tahap ekstraksi dengan SPE,

sampel plasma yang telah ditambahkan

glibenklamid, metformin dan glikazid

dimasukan kedalam cartridge SPE. Setelah

proses SPE dihasilkan sebuah analit yang

nantinya akan dianalisis dengan KCKT.

Fira Aulia Fatan, Gisel Rizuna Qothrunnada, Issabella Elsiana, Kholifatul Ulum, Klaritya

Anisya Kurnia, Shafa Qotrunnada Widyatamaka, Shipa Paujiah

Validasi metode SPE-MIP tentunya

meliputi linearitas, akurasi, presisi, LOD, dan

LOQ. Uji Liniearitas dilihat berdasarkan

kurva kalibrasi yang telah dibuat dengan

persamaan y=1.202x + 3.025 dengan nilai r =

0.998 dan metode ini dapat dikatakan linier.

Selanjutnya, uji akurasi dan presisi

dilihat berdasarkan uji terhadap 3 variasi

konsentrasi. Nilai akurasi SPE-MIP 92.28%;

106,02%, dan 97,39% hal ini memenuhi

syarat yaitu 80-120% sehingga dapat

dikatakan akurat. Uji presisi di lihat

berdasarkan kadar glibenklamid yang

ditetapkan berdasarkan kurva kalibrasinya,

yaitu 1.95%; 4,54%; dan 4,56%. Hal ini

memenuhi syarat yaitu kv<15%. Untuk uji

nilai LOD dan LOQ, dengan hasil nilai LOD

0.519972 g/ml dan LOQ 1.733239 g/ml.

dapat diartikan bahwa validasi metode dengan

pre-treatment SPE-MIP dan dianalisis dengan

KCKT valid memenuhi persyaratan.

Pada penelitian yang dilakukan

fitra,dkk mengenai validasi metode analisis a-

mangostin dalam plasma darah menggunakan

metode KLT-densitometri. A-mangostin

adalah suatu ekstrak tanaman yang banyak

sekali khasiatnya. Validasi metode analisis A-

mangostin menggunakan KLT Densitometri.

Penggunaan metode ini dikarenakan metode

ini relative lebih sederhana, murah, namun

tetap harus memilah fase gerak yang cocok

supaya dapat menghasilkan pemisahan yang

baik antara a-mangostin dan senyawa lain.

Fase gerak yang digunakan adalah kloroform

dan etil asetat (9:1). Setelah proses KLT

terlaksana, plat KLT dikeringkan dan diamati

dibawah sinar UV 254 nm. Diperoleh hasil

nilai Rr = 1 dan Rf = 0.533, (sesuai pada

farmakope herbal Indonesia bahwa nilai rf a –

mangostin 0,53). nilai Rr jarak yang ditempuh

oleh sampel dengan zat pembandingnya

adalah sama, sedangkan nilai Rf adalah jarak

yang ditempuh noda dalam plat KLT. Untuk

membuktikan lebih akurat dari validasi

metode ini adalah dengan melihat kurva

kalibrasi, linearitas, penetapan kadar, uji

akurasi, presisi, dan penentuan batas deteksi

dan batas kuantitas (Sahriawati et al., 2019).

Dapat diperoleh dari Kurva kalibrasi

pada A-mangostin diperoleh hubungan yang

linear dengan konsentrasi analit 50, 100, 150,

200, 250 ppm menghasilkan luas area berturut

turut 1612,19; 2729,28; 3858,69; 4416,25;

dan 5974,31. Dan didapat persamaan

y=594,781 + 20,82242x dengan r==

0,992206. Semakin besar konsentrasi dari

larutan maka akan semakin besar pula luas

areanya, hal ini berdasarkan nilai 0,99 ≤ r ≤ 1.

Pada penetapan kadar menggunakan metode

KLT ini memperoleh kadar yang tinggi,

dikarenakan pada perlakuan sampel A-

mangostin murni ditambahkan ke dalam

plasma darah dan ikatan protein yang terjadi

dilepaskan dengan cara di vortex terlebih

dahulu. Untuk melihat ke-akurasi-an validasi

metode ini berdasarkan parameter persen

perolehan. Perolehan a-mangostin dengan rata

rata 96,0591%, hal ini berada pada range

yang diperbolehkan yaitu 90-107%, bahwa

metode ini memenuhi syarat akurasi.

Selanjutnya presisi, presisi adalah ukuran

yang menunjukan derajat kesesuaian yang

dilakukan secara berulang, pada penelitian

yang dilakukan oleh fitra, dkk diperoleh nilai

%RSD <16% yang dimana hal ini dapat

dikatakan memiliki nilai keterulangan yang

baik. Kemudian, batas deteksi (BD) dan batas

kuantitasi (BK). Nilai yang diperoleh BK dan

BD adalah untuk melihat batas minimum

analit untuk dapat di analisis dan

Pengaruh Motivasi Kerja, Lingkungan Kerja Fisik, Employee Engagement terhadap Kinerja

Perawat di Rumah Sakit Taman Harapan Baru

Jurnal Health Sains, Vol. 3, No.5, Mei 2022 685

mendapatkan tingkat ketelitian dan ketepatan

yang baik.

Pada penelitian yang dilakukan

(Lindawati et al., 2020) mengenai validasi

metode formalin menggunakan

spektrofotometri UV-VIS dengan reagen

pararosaniline HCL. Sampel yang digunakan

adalah cabai hasil panen dan darah manusia

yang telah mengonsumsi cabai tsb.

Spektrofotometri UV-VIS digunakan dalam

validasi metode ini dikarenakan

pengaplikasiannya yang mudah dan murah

dibandingkan dengan HPLC & GC. Pada

metode ini menggunakan reagen

pararosaniline HCL dengan perbandingan

sampel dan reagen 1:1 sampel pada

konsentrasi 0,1 ppm dengan perolehan

absorbansi 0,617. Reagen pararosaniline HCL

akan menghasilkan warna merah jambu agak

ungu pada sampel dan kemudian diamati

menggunakan spektrofotometri UV VIS

Panjang gelombang 539 nm. Untuk validasi

metode dengan melihat parameter spesifisitas,

linearitas, LOD, LOQ, akurasi, dan presisi.

Pada pengujian linearitas dilihat

berdasarkan kurva kalibrasi, nilai r ang

diperoleh adalah 0,996 yang artinya nilai r

mendekati 1 sehingga dapat dikatakan linier

dan nilai Vx0<2. Pengujian LOD dan LOQ

pada penelitian ini diperoleh hasil LOD

mendekati 100% dalam tubuh, sedangkan

LOQ dibawah 100%, dapat diartikan bahwa

analit masih bisa terdeteksi namun sulit untuk

dilihat bata kuantitasinya. Kemudian,

pengukuran tingkat akurasi dari validasi

metode ini diperoleh rata rata 88,173%

dimana rentang keakuratan 85-110%, yang

artinya metode ini dapat dikatakan akurat.

Melihat dari sisi presisi, dilakukan 6 kali

pengukuran diperoleh nilai RSD 1,047%,

dimana syarat RSD <2% yang artinya metode

ini cukup presisi.

Berdasarkan penelitian yang dilakukan

(Wibowo et al., 2018) tentang validasi

metodenbioanalisis vankomisin dalam spiked-

plasma manusia menggunakan Kromatografi

Cair Kinerja Tinggi-detektor UV untuk

pemantauan kadar obat dalam darah. Telah

dilakukan studi pendahuluan optimasi system

kromatografi berupa variasi jumlah

campuran pelarut fase gerak yang digunakan

untuk mendapatkan nilai retensi ideal untuk

aplikasi pemantauan kadar obat dalam darah

(PKOD), dengan Hsil CV 1,21% pada injeksi

spiked-plasma vankomisisn 3,0 µg/mL

dengan kisaran waktu retensi menit ke 5,613

hingga 5,811. Validasi metode bioanalisis

vankomisisn pada plasma darah manusia

menggunakan Teknik kuantitfikasi standar

eksternal kalibrasi ganda. Pasien yang

menerima terapi obat vankomisin memiliki

efek farmakokinetika yang bervariasi, oleh

karena itu rentang kadar yang digunakan

cukup lebar dengan integrasi area puncak

menggunakan model exponentially modified

gaussian (EMG) pendekatan valley-to-valley

event atau pengukuran area puncak dimulai

dari titik awal hingga titik akhir puncak.

Persamaan nilai regresi linear yang

didapat dari hasil penelitian ini yaitu

y=2882,3x-83,805 dengan nilai Limit of

Detection (LoD) 1,56 µg/mL, sedangkan nilai

LoQ (Limit of Quantification) 4,7 µg/mL.

Terdapat korelasi antara area puncak dan

konsentrasi vankomisin karena memenuhi

persyaratan keberterimaan sebesar r > 0,999.

Oleh karena itu didapatkan bahwa metode

validasi bioanalisis vankomisin dalam spiked-

plasma dengan rentang konsentrasi 0 µg/mL –

60 µg/mL yang dikembangkan memenuhi

parameter persyaratan linear uji.

Fira Aulia Fatan, Gisel Rizuna Qothrunnada, Issabella Elsiana, Kholifatul Ulum, Klaritya

Anisya Kurnia, Shafa Qotrunnada Widyatamaka, Shipa Paujiah

Penelitian ini memiliki selekivitas yang

baik dengan memperoleh nilai CV 9,06 dan

nilai %diff pada rentang -12,26 hingga

8,75%, sehingga mampu memisahkan dan

mengkuantifikasi kadar vinkomisin dari

metabolit asing yang dapat mengganggu

proses analisis, dan tidak dipengaruhi oleh

perbedaan sumber plasma. Dilakukan uji

carry-over untuk menentukan keberadaan

analit dalam sampel blanko plasma setelah

analisis pada konsentrasi tinggi yang

dilakukan dengan membandingkan area

blanko plasma yang dihasilkan setelah

pembacaan analit pada konsentrasi tinggu

(ULoQ) dan area LLoQ. Berdasarkan hasil

overlay kromatogram blanko plasma yang

dianalisis setelah injeksi sampel vankomisisn

spiked-plasma konsentrasi tinggi tidak

dihasilkan puncak pada kisaran waktu retensi

vankomisin, yang membuktikan tidak ada

analit vankomisin dalam blanko plasma yang

ikut setelah analisis konsentras tinggi yang

ditetapkan < 20% LLoQ. Oleh karena itu,

pembacaan sampel dapat dilakukan secara

acak tanpa memperhatikan urutan konsentrasi

analit. Pada pengujian akurasi dan presisi

vankomisin dalam spiked-plasma intra-hari

dan antar-hari pada konsentrasi QCM

memenuhi persyaratan % diff dan CV yaitu

kurang dari 15%. Berdasarkan hasil uji

akurasi dan presisi intra-hari (Tabel 1) dan

antar-hari (Tabel 2) didapat bahwa kadar

vabkomisisn yang diperoleh memiliki

kedekatan dengan kadar yang diketahui serta

pengujian dari tiap replikasinya memiliki

kedekatan satu dengan lainnya.

Untuk mengetahui keberadaan

degradasi analit dalam matriks plasma saat

proses analisis, mulai dari penyiapan sampel

hingga proses selesai agar hasilnya akurat dan

memenuh kriteria keberterimaan dilakukan

uji stabilitas vankomisin dalam spiked-plasma

dengan menggunakan QCL (Quality Control-

Low) dan QCH (Quality Control-High).

Berdasarkan hasil uji stabilial didapat bahwa

analit vankomisin dalam matriks plasma tidak

mengalami degradasi dan memenuhi kriteria,

sehingga dapat dinyatakan bahwa vankomisin

mampu stail dalam plasma darah selama 24

jam di suhu kamar (25 C) dan stabil pada

suhu penyimpanan -20 C selama 21 hari.

Pada proses uj stabilitas, dilakukan uji

stabilitas beku-cair, uji stabilitas paska

preparasi atau autosampler.

Berdasarkan penelitian yang dilakukan

Ririn Sumiyani, dkk mengenai validasi

metode penetapan kadar lisinopril.

Pengaruh Motivasi Kerja, Lingkungan Kerja Fisik, Employee Engagement terhadap Kinerja

Perawat di Rumah Sakit Taman Harapan Baru

Jurnal Health Sains, Vol. 3, No.5, Mei 2022 687

Dalam spiked plasma secara Ultra

Performance Liquid Chromatography melalui

derivatisasi dengan 1-fuoro 2,4 dinitrobenzen.

Untuk mendapatkan hasil derivatisasi yang

maksimal perlu dilakukan optimasi pH

pelarut, suhu reaksi, kondisi UPLC (Ultra

Performance Liquid Chromatography), mol

ratio, dan waktu kestabilan produk. Reaksi

derivatisasi lisinopril optimum terjadi pada

pH 11,0 dan hasil optimasi komposisi fase

gerak terbaik pada komposisi fase gerak

dapar assetat (0,01 M, pH

3,5):asetoniril:methanol = 70:10:20 (v/v/v)

dengan laju alir 0,3 mL/menit. Produk

derivatisasi dapat dilakukan mulai

waktu derivatisasi 56-70 menit. Hasil uji

kesesuaian system dengan mengetahui nilai

parameter RSD keterulangan, faktor tailing,

resolusi, dan nilai theoretical plates, serta

faktor kapasitas yang telah memenuhi

persyaratan. Pada validasi metode analisis

digunakan parameter uji linieritas,

selektivitas, batas kuantitasi, batas deteksi,

presisi dan akurasi. Hasil uji selektivitas

menggunakan metode UPLC memenuhi

persyaratan validasi yang dibuktikan dengan

pemisahan yang bagus antara analit dan

komponen lain dan ditunjukan dengan

resolusi analit lebih dari 2,5. Pada uji

linieritas, kurva yang dihasilkan linier

sehingga dapat digunakan sebagai kurva baku

dan perhitungan batas deteksi serta kuantitasi

instrument. Selain itu, nilai % rekoveri dan uji

presisis yang menunjukan nilai 2.46-7.98%

telah memenuhi persyaratan validasi.

Sehingga, hasil uji ketelitian yang dilakukan

telah memenuhi nilai RSD yang telah

ditentukan (RSD ≤ 15%).

Dari semua uji yang telah dibuktikan,

dapat disimpulkan bahwa validasi metode

memenugi persyaratan selektivitas dan

penetapan kadar lisinopril pada spiked¬-

plasma derivatisasi dengan FDNB secara

UPLC mempunyai peluang sebagai metode

Fira Aulia Fatan, Gisel Rizuna Qothrunnada, Issabella Elsiana, Kholifatul Ulum, Klaritya

Anisya Kurnia, Shafa Qotrunnada Widyatamaka, Shipa Paujiah

688 Jurnal Health Sains, Vol. 3, No.5, Mei 2022

alternatif penetapan kadar yang dilakukan

secara HPLC-MS-MS dengan nilai

sensitivitas yang relative sama.

Kesimpulan

Dari beberapa metode validasi serta

senyawa kimia obat yang digunakan dalam

penelitian dengan menggunakan sampel

biologis yaitu plasma darah, mendapatkan

hasil yang seluruhnya memenuhi syarat.

Metode KLT-densitometri dapat dikatakan

sebagai metode yang valid untuk analisis α-

mangostin karena memenuhi parameter

validasi linearitas, akurasi, presisi intraday

diperoleh rata-rata persen RSD yaitu

1,6440%, 2,1993% dan 1,6389%, presisi

interday yaitu 2,8533%, 1,4208%, 3,0985%,

batas deteksi 37,832332 ppm dan batas

kuantitasi 110,8014ppm. Penetapan kadar

lisinopril dalam spiked plasma secara Ultra

Performance Liquid Chromatography (UPLC)

melalui derivatisasi dengan FDNB juga

memenuhi persyaratan validasi.

Uji validasi metode bioanalisis

vankomisin dalam spiked-plasma memenuhi

parameter persyaratan linear uji karena

memenuhi persyaratan keberterimaan sebesar

r > 0,999. Dan validasi metode formalin

menggunakan spektrofotometri UV-VIS

dengan reagen pararosaniline HCL

menunjukan hasil r yang mendeketi 1

sehingga dikatakan linear, untuk hasil LOD,

LOQ, akurasi, dan presisi pun menunjukan

hasil yang dapat dikatakan akurat. Serta untuk

validasi metode Glibenklamid dengan pre-

treatment SPE-MIP dan dianalisis dengan

KCKT yang meliputi linearitas, akurasi,

presisi, LOD, dan LOQ juga valid memenuhi

persyaratan. Sehingga dapat dikatakan bahwa

plasma darah cukup akurat jika digunakan

sebagai sampel pada metode validasi analisis

BIBLIOGRAFI

Fauziah, F., Kardela, W., Rasyid, R., & Silvi,

M. (2017). Validasi Metode Analisis A-

Mangostin dalam Plasma Darah

Manusia Secara In Vitro dengan

Kromatografi Lapis Tipis-Densitometri.

Jurnal Farmasi Higea, 9(2), 96–

102.Google Scholar

Lindawati, L., Salamah, I., Asriyadi, A., &

Fadhli, M. (2020). Sistem Persediaan

Slot Parkir Dengan Pengaman Data

Berbasis Arduino. Jurnal Digit, 9(2),

122–131. Google Scholar

Rizalina, H., Cahyono, E., Mursiti, S., &

Nurcahyo, B. (2018). Optimasi

Penentuan Kadar Metanol dalam Darah

Menggunakan Gas Chromatography.

Indonesian Journal of Chemical

Science, 7(3), 254–261. Google Scholar

Rohayati, A., Hasanah, A. N., Saptarini, N.

M., & Aryanti, A. D. (2015). Optimasi

Kondisi Pemisahan Glibenklamid

Kombinasi Metformin dalam Plasma

Darah Menggunakan KCKT

Optimization of Separation Condition of

Glibenclamide and Metformin in Blood

Plasma Using HPLC. Ijpst, 2(3), 96–

104.

Sahriawati, S., Sumarlin, S., & Wahyuni, S.

(2019). Validasi Metode dan Penetapan

Kadar Kolesterol Ayam Broiler dengan

Metode Lieberman-Burchard. Lutjanus,

24(2), 31–40. Google Scholar

Susanto, E. (2019). Peptida Bioaktif sebagai

Antioksidan Eksplorasi pada Ceker

Ayam. Deepublish. Google Scholar

Sumiyani, Ririn. Martono, Sudibyo.

Sugiyanto. (2016). Validasi Metode

Penetapan Kadar Lisinopril dalam

Spiked Plasma Secara Ultra

Performance Liquid Chromatography

Melalui Derivatisasi dengan 1-Fluoro

2,4 Dinitrobenzen. Jurna Google

Scholar l Farmasi Indonesia, 8(1), 344-

355. Google Scholar

Pengaruh Motivasi Kerja, Lingkungan Kerja Fisik, Employee Engagement terhadap Kinerja

Perawat di Rumah Sakit Taman Harapan Baru

Jurnal Health Sains, Vol. 3, No.5, Mei 2022 689

Setyanigrum, Lindawati. Christiana,

Wahyuni. Kuswandi, Bambang. (2019).

Validasi Metode Spektrofotometri UV-

VIS untuk Analisis Formalin

Menggunakan Pararosanilline HCl pada

Sampel Plasma Darah. Jurnal

Kesehatan dr. Soebandi, 7(1), 13-

22. Google Scholar

Wibowo, A. A., Lusiani, C. E., Ginting, R.

R., & Hartanto, D. (2018). Simulasi

CHEMCAD: Studi Kasus Distilasi

Ekstraktif pada Campuran Terner n-

Propil Asetat/n-Propanol/Air. Jurnal

Teknik Kimia Dan Lingkungan, 2(2),

75–83. Google Scholar

Fira Aulia Fatan, Gisel Rizuna Qothrunnada, Issabella Elsiana, Kholifatul Ulum, Klaritya

Anisya Kurnia, Shafa Qotrunnada Widyatamaka, Shipa Paujiah (2022)

First publication right:

Jurnal Health Sains

This article is licensed under: